貨號：WT-E5288【犬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】ELISA基礎(chǔ)知識及常見問題處理

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）

?ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種酶免疫測定。在檢驗中主要通過抗原抗體于固相或液相載體中反應(yīng)檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。通過辣根過氧化物酶（HRP)與底物液TBM的反應(yīng)指示出所檢測物質(zhì)的有無。

?1　抗原：抗原是能在機(jī)體中引起特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)。

?2　抗體：抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。

?　　 機(jī)體被微生物感染后，先產(chǎn)生IgM抗體，然后產(chǎn)生IgG抗體。經(jīng)過一段時間，IgM抗體量逐漸減少而消失，而IgG抗體可*存在，在疾病*后可持續(xù)數(shù)年之久。

【犬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】ELISA檢測方法

?夾心法:

?雙抗原（抗體）夾心法是檢測抗原zui常用的方法，其檢測方法：

?雙抗原夾心：

?    固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標(biāo)抗原Ag*  → Ag-Ab-Ag* + 底物(TMB)→顯色

?雙抗體夾心：

?    固相(包被)抗體Ab + 樣品(抗原Ag) + 酶標(biāo)抗體Ab *  → Ab-Ag-Ab* + 底物(TMB)→顯色

【犬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】間接法

?間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗*抗體）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。

?其檢測方法：

?     固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標(biāo)二抗Ab*  → Ag-Ab-抗Ab* + 底物(TMB)→顯色

【犬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】?競爭法

?其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)：

?固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標(biāo)抗體Ab*  → Ag-Ab + 底物(TMB)→不顯色(+)

?固相(包被)抗原Ag + 樣品(無抗體Ab) + 酶標(biāo)抗體Ab*  → Ag-Ab* + 底物(TMB)→顯色(-)

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