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技術(shù)文章

Elisa試劑盒中參考血清和免疫酶單位

閱讀：231發(fā)布時(shí)間：2015-2-26

    ELISA試劑盒中用ELISA檢測(cè)時(shí)（以檢測(cè)弓漿蟲(chóng)IgM為例），用無(wú)特異抗體的血清稀釋陽(yáng)性血清繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，選擇的稀釋度應(yīng)很容易區(qū)別陽(yáng)性和陰影結(jié)果的稀釋度。每次試驗(yàn)均應(yīng)同時(shí)使用陰性對(duì)照血清，可選擇強(qiáng)陽(yáng)性的血清作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照血清，并可自己設(shè)定其為100單位（免疫酶單位-EIU）。這樣每次試驗(yàn)均參考陽(yáng)性血清結(jié)果確定每份血清的相對(duì)抗體水平，其計(jì)算公式如下：標(biāo)本值-陰性對(duì)照值 陽(yáng)性對(duì)照值-陰性對(duì)照值

抗體水平（樣本）=（標(biāo)準(zhǔn)值-陰性對(duì)照值）/（陽(yáng)性對(duì)照值-陰性對(duì)照值）×100%EIU

用在450nm檢測(cè)的吸光度計(jì)算，zui后的值為EIU。

    如果國(guó)內(nèi)或上的標(biāo)準(zhǔn)抗體和檢測(cè)方法，那么所用的參考血清應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)血清對(duì)照實(shí)驗(yàn)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，但如果所用的檢測(cè)方法不同，標(biāo)準(zhǔn)化時(shí)就存在差別，不同的方法檢測(cè)出的結(jié)果不能反映出參考血清和標(biāo)準(zhǔn)血清之間的差別。

    自己制備的標(biāo)準(zhǔn)參考血清應(yīng)保證質(zhì)量，并要有足夠的血清，小量分裝存儲(chǔ)與-20℃，或凍干存儲(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)血清檢測(cè)的吸光度值應(yīng)保證在一定范圍內(nèi)，以便檢測(cè)每次試驗(yàn)的吸光度值的變化。


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