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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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鼠抗人肥大細(xì)胞類單克隆抗體的制備過程

時(shí)間:2022/6/14閱讀:859
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鼠抗人肥大細(xì)胞類單克隆抗體的制備過程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

SW626(人卵巢癌細(xì)胞)

T-24(人膀胱癌細(xì)胞)

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TF-1(人血液白血病細(xì)胞)

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TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)

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YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

ZR-75-1(人乳腺癌細(xì)胞)

ZR-75-30(人乳腺癌細(xì)胞)


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