亚洲精品中文视频,在线观看aaa,丁香五月欧美成人,亚洲成人高清,成人免费观看视频在线观看,在线日韩中文,成人av免费播放

上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

15021460884

elisa試劑盒
Hcy Elisa 試劑盒 IL-22 Elisa Kit S-100B Elisa Kit VE Elisa Kit IgG elisa Kit 超氧化物歧化酶elisa 試劑盒 NF-KB ELISA定量試劑盒 IRF1 ELISA定量試劑盒 GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 SOD 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GPX 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GSG 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GT-17檢測(cè)ELISA試劑盒 E2檢測(cè)ELISA試劑盒 庚肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒 GS elisa 試劑盒 T Elisa Kit PⅢNP Elisa Kit NRG3 Elisa Kit ENA-78/CXCL5 Elisa Kit Wnt-3a蛋白Elisa試劑盒 抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒 白介素20Elisa試劑盒 蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒 鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2δElisa試劑盒 肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒 胎盤泌乳素Elisa試劑盒 多巴胺Elisa試劑盒 鴨elisa試劑盒說(shuō)明書 羊elisa試劑盒說(shuō)明書 魚elisa試劑盒說(shuō)明書 植物elisa試劑盒說(shuō)明書 貂elisa試劑盒說(shuō)明書 鵝elisa試劑盒說(shuō)明書 鴿子elisa試劑盒說(shuō)明書 狗elisa試劑盒說(shuō)明書 鮭魚elisa試劑盒說(shuō)明書 甲型流感elisa試劑盒說(shuō)明書 鯨elisa試劑盒說(shuō)明書 鹿elisa試劑盒說(shuō)明書 驢elisa試劑盒說(shuō)明書 裸鼠elisa試劑盒說(shuō)明書 駱駝elisa試劑盒說(shuō)明書 倉(cāng)鼠elisa試劑盒說(shuō)明書 大鼠elisa試劑盒說(shuō)明書 猴elisa試劑盒說(shuō)明書 雞elisa試劑盒說(shuō)明書 馬elisa試劑盒說(shuō)明書 貓elisa試劑盒說(shuō)明書 綿羊elisa試劑盒說(shuō)明書 牛elisa試劑盒說(shuō)明書 犬elisa試劑盒說(shuō)明書 人elisa試劑盒說(shuō)明書 山羊elisa試劑盒說(shuō)明書 兔ELSIA試劑盒 豚鼠elisa試劑盒說(shuō)明書 小鼠elisa試劑盒 豬elisa試劑盒 丁肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒 其它elisa試劑盒說(shuō)明書
生化試劑
細(xì)胞
培養(yǎng)基
進(jìn)口elisa試劑盒
ATCC細(xì)胞
PCR試劑盒
血清
質(zhì)粒
LAMP試劑盒
科研細(xì)胞
ELISA檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞分析
原代細(xì)胞

改良過(guò)碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

時(shí)間:2016/2/19閱讀:1734
分享:

改良過(guò)碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    HRP分子中與酶活性無(wú)關(guān)的糖基被過(guò)碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

(1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無(wú)水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;

(2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色;

(3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);

(4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 C,調(diào)節(jié)pH值至9.0;

(5) 混勻,置4℃過(guò)夜

(6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;

(7) 對(duì)0.01mol/L,pH7.4 ,4℃透析過(guò)夜,換液3次;

(8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;

(9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

【注意事項(xiàng)】

(1) 在氧化HRP時(shí),以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。

(2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。

(3) 氧化HRP時(shí)間以15-30min為宜。

(4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。

(5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L C配制。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言