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血清中和試驗(yàn)(SN) 檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征

閱讀:810發(fā)布時(shí)間:2011-4-2

一般來說,在群體水平上血清學(xué)診斷易操作,特異性強(qiáng),敏感性高。但對(duì)個(gè)體的檢測(cè)則比較困難,有時(shí)出現(xiàn)非特異性反應(yīng),但可以在2~3周后取樣復(fù)測(cè)解決此問題。血清學(xué)檢測(cè)一般用吸附試驗(yàn)(如IPMA、IF、ELISA),這些試驗(yàn)常用某種抗原型的病毒進(jìn)行,對(duì)其他抗原異型病毒抗體的靈敏度較低。應(yīng)用抗體結(jié)合試驗(yàn),在病豬感染了7~14天檢出抗病毒抗體,30~50天抗體滴度出現(xiàn)高峰。有些在病豬感染后3~6個(gè)月內(nèi)血清轉(zhuǎn)為陰性,有些病豬血清陽(yáng)性維持較久。中和抗體在病豬感染后出現(xiàn)較慢,但滴度不高。可在感染后3-4周檢測(cè)到中和抗體,這種抗體能維持1年或更長(zhǎng)時(shí)間。有報(bào)道,在血清中和試驗(yàn)中使用補(bǔ)體能提高試驗(yàn)的靈敏度。關(guān)于病豬感染后血清陽(yáng)性持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短,目前尚未進(jìn)行廣泛深入的研究,因其有可能隨試驗(yàn)方法不同而異。母源抗體半衰期為12一14天,一般仔豬在出生后4~8周內(nèi)可檢測(cè)到病毒,隨母豬生產(chǎn)時(shí)的滴度及所用試驗(yàn)方法而異。在污染的環(huán)境中,血清學(xué)檢測(cè)為陽(yáng)性的母豬所產(chǎn)仔豬能在3~6周齡時(shí)血清轉(zhuǎn)為陽(yáng)性。應(yīng)用巨噬細(xì)胞分離病毒以及利用兩類血清型病毒的IPMA在實(shí)驗(yàn)室容易操作,這種試驗(yàn)可用MARC-145細(xì)胞系增殖歐洲型病毒和美洲型病毒操作。使用MARC-145細(xì)胞系做間接免疫熒光試驗(yàn)(1FA)能順利進(jìn)行PRRSV血清學(xué)反應(yīng)。目前,靈敏度高、特異性強(qiáng)商品化的ELISA試劑盒已經(jīng)上市。同時(shí),國(guó)內(nèi)學(xué)者還開發(fā)了乳膠凝集試劑盒,可用于PRRSV抗體快速監(jiān)測(cè)。

血清中和試驗(yàn)(SN) 血清中和試驗(yàn)檢測(cè)PRRS抗體雖然特異性好,但PRRS的SN抗體比IFA抗體在血清中出現(xiàn)得晚,一般在感染后的4~6周才出現(xiàn)中和抗體,因此SN不適宜進(jìn)行早期診斷。Christianson等(1992)報(bào)道SN的敏感性比IFA低,Yoon等(1994)對(duì)常規(guī)SN進(jìn)行改良,在試驗(yàn)中加入20%豚鼠血清以增加補(bǔ)體的含量,從而提高SN的敏感性,在感染后的9-11天即可檢測(cè)到較高滴度的SN抗體。SN抗體比IFA抗體存留的時(shí)間長(zhǎng),可維持半年以上。但由于對(duì)急性感染的敏感性較差,要求血清無(wú)污染,而且細(xì)胞培養(yǎng)工作量大,技術(shù)性強(qiáng),目前于實(shí)驗(yàn)室研究應(yīng)用。

 


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