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當(dāng)前位置:上海通蔚生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒標(biāo)本保存您了解多少
常有ELISA操作員反映在標(biāo)本保存時(shí)出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,ELISA試劑盒標(biāo)本保存,在ELISA試劑盒試驗(yàn)中是非常重要的,我公司技術(shù)員特針對(duì)相關(guān)常見(jiàn)問(wèn)題做出總結(jié),下面我們就來(lái)看看今日的內(nèi)容:搞定ELISA試劑盒辦法我有好辦法!
一、標(biāo)本凝集不全
在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下,正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚,18~24h*凝聚。臨床查驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)刻快速檢測(cè),常在血液還未初步凝聚時(shí)即強(qiáng)行離心分別血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易形成假陽(yáng)性作用;這類狀況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查作用變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜鰺_作用,處理的辦法是血液標(biāo)本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分別血清,或標(biāo)本搜集時(shí)用帶分別膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />二、標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響
抗凝劑、酶抑制劑及快速分別血清的分別膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有必定煩擾作用。
?三、標(biāo)本溶血
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,ELISA試劑盒煩擾測(cè)定作用。為打敗上述煩擾作用,標(biāo)本搜集時(shí)有必要留意避免溶血。
四、標(biāo)本保存不妥
在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、乃至形成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充沛混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不行激烈振蕩。
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五、標(biāo)本受細(xì)菌污染
做好了ELISA試劑盒要素和操作要素之后,確保檢測(cè)作用的準(zhǔn)確性就簡(jiǎn)單的多了。我公司試劑盒供給全程輔導(dǎo)服務(wù),為您的試驗(yàn)擔(dān)任究竟!
因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而煩擾測(cè)定作用。歡迎您laidian咨詢我司業(yè)務(wù)員。 ?
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