小鼠腺苷A2b受體(ADORA2b)ELISA試劑盒深圳子科生物技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù);
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小鼠腺苷A2b受體(ADORA2b)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。
小鼠腺苷A2b受體(ADORA2b)ELISA試劑盒β-Actin(內(nèi)參抗體) β-肌動蛋白(抗體)(濃縮液) 子科生物ZIKER
Anti-GAPDH (內(nèi)參抗體)(暫無現(xiàn)貨) 3-磷酸甘油醛脫氫酶(小鼠來源)(暫無現(xiàn)貨) 子科生物ZIKER
WIP(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation) WIP組織細(xì)胞裂解液 (含使用方法說明) 子科生物ZIKER
ELS BufferSC (Erythrocyte Lysing Solution,ELS) 紅細(xì)胞裂解液 子科生物ZIKER
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白濃度測定試劑盒 子科生物ZIKER
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白濃度測定試劑盒 子科生物ZIKER
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白濃度測定試劑盒 子科生物ZIKER
Bradford Bradford 蛋白濃度測定試劑盒 子科生物ZIKER
Acrylamide 丙烯酰胺 子科生物ZIKER
30% Acrylamide 30%丙烯酰胺 子科生物ZIKER
SDS-PAGE kit SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 子科生物ZIKER
SDS-PAGE Running Buffer Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液(粉劑) 子科生物ZIKER
SDS-PAGE loading buffer 蛋白電泳上樣緩沖液(5倍稀釋) 子科生物ZIKER
Commassie Blue Fast Staining Solution 考馬斯亮藍(lán)快速染色液 子科生物ZIKER
Protein Marker 超低范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(3.3-20.1kDa)/5條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 低范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-97.4kDa)/6條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 預(yù)染寬范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(19-117KD)/6條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 次高蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(43-200kDa)/5條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 預(yù)染低范圍蛋白質(zhì)分子量Marker(14.4-97.4kDa)/6條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 預(yù)染次高蛋白分子量Marker(43-200kDa)/5條帶 子科生物ZIKER
Protein Marker 預(yù)染藍(lán)色蛋白質(zhì)Marker 子科生物ZIKER
WB Antibody Diluent WB一抗稀釋液 子科生物ZIKER
WB二抗稀釋液 子科生物ZIKER
Western Transfer Buffer 電轉(zhuǎn)移緩沖液(Western轉(zhuǎn)膜液) 子科生物ZIKER
Western Blot Wash Buffer WB洗滌液 子科生物ZIKER
Super ECL Plus Detection Reagent Western Blot ECL超敏發(fā)光液(暫無現(xiàn)貨) 子科生物ZIKER
Western Blocking Buffer WB封閉液 子科生物ZIKER
KODAK膠片 子科生物ZIKER
顯影液試劑 子科生物ZIKER
定影液試劑 子科生物ZIKER
4-Chloro-1-Naphthol Stainning Kit 氯萘酚染色試劑盒 子科生物ZIKER