小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10）ELISA試劑盒試劑的準(zhǔn)備：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
500pg/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
250pg/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
62.5pg/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
31.2pg/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15.6pg/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0pg/ml   （空白對(duì)照）   原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
 
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10）ELISA試劑盒試劑盒性能： 
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
 
操作步驟：
1. 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
 
結(jié)果判斷與分析：
1、 儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的LTB4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10）ELISA試劑盒生物素標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
FITC標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
蛋白質(zhì)A標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
HRP標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
AP標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
TRITC標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
Cy2標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
Cy3標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
Cy5標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
EGFP標(biāo)記二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
GST（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
HA（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
FLAG（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
P53（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
HIS（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
ACTIN（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升
GPDGP（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）    100微升