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人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒TH試劑盒

時(shí)間:2017-8-22閱讀:84
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人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒TH試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中客戶(hù)經(jīng)常遇到的的疑問(wèn)如下,下面技術(shù)部做了以下一問(wèn)一答的介紹,希望可以幫助到廣大客戶(hù):
1、我能否在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前一天收集樣品? 
●除非試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)特別說(shuō)明不允許,一般都可以。
如果收集的樣品不能夠及時(shí)進(jìn)行檢測(cè), 請(qǐng)保存至-20℃或者按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行保存。應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
● -20℃是推薦的冷藏保存溫度。解凍的平衡過(guò)程可能會(huì)導(dǎo)致樣品的降解。

2、我是否必需按照試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)中的方法準(zhǔn)備樣品?
●  推薦的樣品準(zhǔn)備方法是經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的好的方法,所以推薦按照說(shuō)明書(shū)上的方法制備樣 品。 

3、我能否不用推薦的收集方法來(lái)收集血漿? 
●  每一次按照推薦步驟操作的測(cè)定都是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證可行的。在某些測(cè)定中有些抗凝劑是不被推薦 的。具體請(qǐng)參看說(shuō)明書(shū)。
● 有些待檢測(cè)的分析物也存在于血小板中,因此,推薦使用低血小板血漿。正確的收集操作方 法請(qǐng)參看說(shuō)明書(shū)。 

4、我能否使用自己的稀釋液或者緩沖液? 
●  每個(gè)試劑盒中都含有按配方配制的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液,以確保待檢測(cè)的樣品 被正確稀釋。具體請(qǐng)參看說(shuō)明書(shū)。 。

6.人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒TH試劑盒溫度怎樣影響結(jié)果? 
●堿性磷酸酶或者辣根過(guò)氧化物酶都是光敏感型酶。光密度單位或者相對(duì)光單位都會(huì)隨著溫度 的改變而變化。
● 避免在環(huán)境條件變化劇烈的地方孵育。(比如通風(fēng)口,窗口這些溫度和光照都劇烈變化的地 方) 為了保證酶結(jié)合物和底物反應(yīng)*:
●對(duì)于比色法測(cè)定: 將同體積的結(jié)合物和底物溶液充分混合(對(duì)于高靈敏度的試劑盒,在加入同體積的結(jié)合物和 底物一分鐘之后,再加入等體積的擴(kuò)增劑)。顏色若不是立即顯現(xiàn),則檢查所加成分是否在 正確的貯藏溫度下保存,是否被污染,是否在有效期內(nèi)。 

7、我是否需要校正波長(zhǎng)? 
● 對(duì)于比色法測(cè)定,需要通過(guò)校正波長(zhǎng)來(lái)減少誤差。

8、如果我沒(méi)有校正波長(zhǎng)應(yīng)該怎么辦? 
● 將所讀波長(zhǎng)減去原始校正波長(zhǎng)。這個(gè)方法可以更正光學(xué)誤差。 

9、我的酶標(biāo)儀上沒(méi)有說(shuō)明上推薦的那種用來(lái)校正波長(zhǎng)的濾光片,我可以用別的嗎? 
● 可以。只要選擇的波長(zhǎng)高于推薦的校正波長(zhǎng)即可。 

10、我的酶標(biāo)儀沒(méi)有說(shuō)明書(shū)上推薦的波長(zhǎng),我可以用別的嗎? 
● 推薦波長(zhǎng)由使用的底物和反應(yīng)后顏色的峰吸收度決定。說(shuō)明書(shū)上一般都有相應(yīng)數(shù)據(jù),如果沒(méi)有,則選擇zui接近的波長(zhǎng)。不過(guò),這種數(shù)據(jù)變化比較大。 

11、為什么我的相對(duì)光單位與說(shuō)明書(shū)上的不一致? 
●  由于工業(yè)上對(duì)于光單位的衡量沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),所以相對(duì)光單位在酶標(biāo)儀之間的變化非常 大。相對(duì)光單位的數(shù)值應(yīng)該具有可比性。 
● 使用推薦的酶標(biāo)儀設(shè)置,如果使用不同的酶標(biāo)儀則進(jìn)行相應(yīng)的等值設(shè)置。不同的設(shè)置會(huì)產(chǎn)生 不同的信號(hào)。 
●  在讀數(shù)窗口準(zhǔn)確讀數(shù)。 

12、我是按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行測(cè)定的,但是沒(méi)有任何信號(hào),為什么? 
●對(duì)于使用HRP底物的比色測(cè)定,終止液的加入會(huì)使底物變色。而說(shuō)明書(shū)推薦的波長(zhǎng)就是zui 適波長(zhǎng)。 
● 通過(guò)輕拍酶標(biāo)板的邊緣充分混合孔內(nèi)試劑。加入終止液的時(shí),顏色由藍(lán)變黃(如果是HRP 底物)。如果加終止液之前孔內(nèi)試劑沒(méi)有混合,則底物顏色變綠。 
● 可能加入試劑的順序錯(cuò)誤。
● 加入底物溶液以后不要清洗酶標(biāo)板。 
● 在連續(xù)稀釋時(shí)確定已經(jīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品。 
● 如果底物系統(tǒng)中有兩個(gè)成分,則必需混合均勻。 
● 確定酶標(biāo)儀的使用和操作正確。 
●確定試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,樣品都正確配制并按照說(shuō)明滴加無(wú)誤。 
● 對(duì)于高敏感性試劑盒,確定使用的底物和放大劑都正確稀釋。 

13、引起高背景的原因有哪些? 
● 孵育時(shí)間和溫度的改變。 
● 不恰當(dāng)?shù)南礈臁?nbsp;
● 試劑被污染。 
● 孵育時(shí)酶標(biāo)板被污染。 
●蓋板,容器或者槍頭的重復(fù)使用

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