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小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核實驗結(jié)果分析

2018-10-8  閱讀(20203)

小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核實驗方法與步驟
(1)處理:取骨髓前24h先給小鼠腹腔注入,注射劑量為100mg/kg動物體重。(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布來回搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關(guān)節(jié)頭,然后用注射器吸取5ml生理鹽水,插入股骨一端,將骨髓細(xì)胞沖洗至10ml的離心管中??芍貜?fù)沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。(3)離心處理:將所獲得的細(xì)胞懸浮液以 1000rpm離心10min,吸去上清液,在沉淀物中加入2滴滅活的小牛血清,制成細(xì)胞懸液。(4)涂片:滴一滴懸液于載玻片一端,按常規(guī)方法涂片,在空氣中晾干。(5)固定:將晾干的載玻片放入甲醇固定液中10min,取出晾干。(6)染色:將制片平放在玻璃板上,用1∶9∶10的 Giemsa∶PBS∶瑞氏染液,染色15min,流水沖洗后晾干即可鏡檢。(7)觀察:嗜多染紅細(xì)胞為年幼紅細(xì)胞,呈灰藍(lán)色,略大于紅細(xì)胞(紅色),微核多呈圓形和橢圓形,呈藍(lán)紫色或紫紅色。(8)人源細(xì)胞 結(jié)果分析:在顯微鏡下,每只小鼠骨髓涂片標(biāo)本計數(shù)1000~2000個嗜多染紅細(xì)胞,包括其中出現(xiàn)微核的細(xì)胞數(shù),將結(jié)果填入表內(nèi),并計算微核細(xì)胞率,觀察記錄結(jié)果。

 



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