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大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1的傳代方法和細胞冷凍方法

2019-1-2  閱讀(415)

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 傳代方法

1.從動物胚胎或者一些剛出生的動物的器官或者組織上取得細胞,配制成細胞懸浮液.把細胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).

但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.

因為RBL-1大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞在那個瓶壁上生長的時候,如果大量增殖,細胞之間會彼此相碰,細胞細胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.

2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用再把它們分開,然后再配制成細胞懸浮液,分開裝到好幾個瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1細胞冷凍方法

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽儲存。

冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。



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