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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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細(xì)胞培養(yǎng)

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植物細(xì)胞組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作

2019-7-5  閱讀(424)

                                      植物細(xì)胞組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作

研究目的 植物細(xì)胞組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以后分布情況,從而實(shí)現(xiàn)移植細(xì)胞的追蹤。特別是螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)記的細(xì)胞,在小動(dòng)物體內(nèi)移植以后,可以利用小動(dòng)物活體成像儀實(shí)現(xiàn)細(xì)胞移植后的活體細(xì)胞追蹤。

實(shí)驗(yàn)材料:

 儀器設(shè)備:1.酒精燈、三角燒瓶,培養(yǎng)皿;2.鑷子、剪刀、剖針;3.雙筒解剖顯微鏡;4.光照培養(yǎng)箱或溫室;

 材料煙草無(wú)菌苗、豌豆幼苗。

 試劑

  (1)MS培養(yǎng)基,植物激素:NAA、6-BA等;

(2)飽和漂液(次氯酸鈉);

(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;

(4)無(wú)菌水

  四.實(shí)驗(yàn)步驟

  豌豆苗的莖尖培養(yǎng)

    ⑴取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株,簡(jiǎn)取1厘米左右的莖尖,浸入70%的酒精中1分鐘,再浸入飽和次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘,(此步以后要求無(wú)菌)用無(wú)菌水中沖洗5次,在滅菌的濾紙上吸干水分,放入滅菌的培養(yǎng)皿中。

 ⑵在雙目解剖鏡下,用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長(zhǎng)錐,用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐。

 ⑶將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-芐基腺嘌呤(6-BA)的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織形成,用封口膜將培養(yǎng)皿封好。

  (4)在恒溫培養(yǎng)箱中,26℃下,培養(yǎng)六周,形成愈傷組織,經(jīng)繼代后,可用于生根培養(yǎng)



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