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大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1操作步驟

2019-10-25  閱讀(309)

               大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1操作步驟

多明媚的秋天哪,這里,再也不是焦土和灰燼,這是千萬座山風(fēng)都披著紅毯的旺盛的國土。那滿身嵌著彈皮的紅松,仍然活著,傲立在高高的山巖上,山谷中汽笛歡騰,白望在稻田里緩緩飛翔。當(dāng)峭厲的西風(fēng)把天空刷得愈加高遠(yuǎn)的時候;當(dāng)陌上呼頭的孩子望斷了后一只南飛雁的時候;當(dāng)遼闊的大野無邊的青草被搖曳得株株枯黃的時候——當(dāng)在這個時候,便是秋了,便是樹木落葉的季節(jié)了。接下來介紹  大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1操作步驟

操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量,使的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。

2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

細(xì)胞特性

1)細(xì)胞來源于人胎盤組織。

2)細(xì)胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。



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