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上皮細胞株常見問題解析

2018-9-18  閱讀(255)

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【詳細說明】

上皮細胞株常見問題解析
一、為什么培養(yǎng)基中可以省去酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑,研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素),為避免固醇類反應(yīng),用無酚紅培養(yǎng)基。

二、在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,有效期是多長?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

三、如何選用培養(yǎng)基?

選擇培養(yǎng)基沒有一定標準,有幾點建議可供參考:

建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細胞的培養(yǎng)基??梢圆殚單墨I,或在購買細胞株時咨詢。

本單位慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。

根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選1640;進行細胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實驗,可選擇IMDM。

用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)果選擇*培養(yǎng)基,這是zui客觀的方法,但比較繁瑣。

四、選擇便宜的培養(yǎng)基品種成本就低嗎?

通常,培養(yǎng)基可以適合多種細胞,細胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長;例如在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。

培養(yǎng)基養(yǎng)份不同會導致細胞生果不同,病毒或蛋白表達不同,應(yīng)該選擇效果的培養(yǎng)基,考慮生物制品的綜合成本;

zui終目的是追求生物制品的得率——得率高則成本低。

五、細胞生長質(zhì)量很好,為什么病毒、蛋白表達量沒有提高?

 細胞生長質(zhì)量高是高表達的必要條件。

 采用細胞的疫苗是體外培養(yǎng)一定量的動物細胞并接種病毒,利用病毒在細胞內(nèi)增殖,得到預期的病毒抗原,然后制成疫苗。細胞生長質(zhì)量包括細胞密度和形態(tài),沒有好的細胞生長質(zhì)量就不可能有高的表達量。
 但要注意的是,細胞生長質(zhì)量好、密度厚度大時候病毒接種量也應(yīng)該相應(yīng)增大,表達量才會提高,否則前期的高質(zhì)量細胞培養(yǎng)就可能浪費了。
 同時病毒、蛋白的表達、分泌在一定濃度下可能會飽和,因此如欲獲得高表達,還須研究合適的收液時間和次數(shù)。

 



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