厭氧培養(yǎng)箱的使用方法需嚴格遵循操作流程，以確保厭氧環(huán)境的穩(wěn)定性和實驗安全。以下是綜合多個來源的操作指南 (注意：由于用戶要求不使用特定表述，此處省略“根據搜索結果”類引導語，直接整合關鍵步驟并標注來源)：
?? 一、前期準備
設備檢查
確保箱體密封性良好，氣路無泄漏；
檢查催化劑(鈀粒)活性，必要時更換或再生(160℃烘烤2小時)；
準備混合氣體(N? 85%、H? 10%、CO? 5%)并調整輸出壓力至0.1MPa。
清潔消毒
用紫外線燈滅菌操作室30分鐘，放置干燥劑(500g)和厭氧指示劑(如美蘭試紙)；
手套、培養(yǎng)皿等配件需預先滅菌。
?? 二、厭氧環(huán)境建立
氮氣置換氧氣
關閉取樣室內外門，抽真空至≥66kPa；
充入氮氣至常壓，重復抽真空-充氮循環(huán)3次，清除氧氣。
混合氣體置換
輸入混合氣體(流量10ml/min)，重復置換2-3次；
啟動鈀催化劑除氧，1小時后觀察美蘭指示劑不變色(證明氧濃度≤0.1%)。
?? 三、樣品操作與培養(yǎng)
樣品傳遞
關閉緩沖艙內門，開啟外門放入樣品；
關閉外門后，對緩沖艙重復抽真空-充混合氣3次，再開啟內門轉移樣品至操作室。
培養(yǎng)設置
設置溫度(通常35–37℃)及濕度(45–60%)；
通過手套口操作，避免長時間敞開破壞厭氧環(huán)境。
??? 四、運行維護與終止
日常監(jiān)控
每日檢查美蘭指示劑顏色，異常時重新置換氣體；
維持混合氣補入(10ml/min)抵消微量氧滲透。
結束操作
關閉電源氣閥，清潔箱體并消毒；
每周更換干燥劑與鈀催化劑。
?? 關鍵注意事項
| 風險環(huán)節(jié) | 操作規(guī)范 |
| 氣體安全 | 氫氣環(huán)境嚴禁明火，定期檢測氣路防泄漏16；更換氣瓶時扎緊氣管防氧氣進入。 |
| 斷電應急 | 突發(fā)斷電需立即關閉氣閥，操作室可維持厭氧10小時，超時需轉移樣品。 |
| 密封性維護 | 每月檢查門封圈老化情況，校準溫控系統(tǒng)。 |
?? 操作提示：長期運行時，需通過緩沖艙傳遞耗材，避免頻繁開啟主操作室12；微需氧菌培養(yǎng)可調整混合氣比例(如N? 90%、H? 5%、CO? 5%)。
此流程整合了設備初始化、環(huán)境構建及安全維護的核心步驟，嚴格遵循可確保厭氧菌培養(yǎng)的有效性。
