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國產ELISA試劑盒克隆化的方法軟瓊脂平板法分析

時間:2017/2/7閱讀:890
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國產ELISA試劑盒克隆化的方法軟瓊脂平板法分析

.國產ELISA試劑盒配2.5%的瓊脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。

2.將7ml*DMEM液和3ml0倍濃度的DMEM液混合,置45℃水浴預熱。

3.將瓊脂糖與DMEM液混合,即為含0.5%瓊脂糖的*DMEM液,并加75×08脾細胞。

4.每塊平皿加0ml,于室溫中凝固。

5.DMEM中的細胞與DMEM—瓊脂:混合,將細胞瓊脂混合物2ml鋪于凝固的平板上,使其全部覆蓋。

6.放入CO2箱飽和濕度,37℃培養(yǎng)0天。

7.用PBS配制0.6%瓊脂糖,于沸水浴溶解后,置45℃,在保溫情況下取一試管,國產ELISA試劑盒迅速加入0.ml25%羊紅血球,0.2ml豚鼠補體,2.7ml0.6%瓊脂糖。

8.用3ml瓊脂糖—羊紅血球混合液覆蓋克隆。于37℃CO2箱孵育h~2h。從克隆上部溶解羊紅血球的溶血范圍,可篩選抗羊紅血球Ig。

 

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