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正常人羊膜細(xì)胞(HAM)原代細(xì)胞培養(yǎng)

2011年05月17日 08:58:13人氣:606來源:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

實(shí)驗(yàn)材料:
1. 人胎盤;
2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(*,50μg/ml;*,1.25μg/ml;*100μg/ml;*100U/ml);
3. 丙三醇;
4. 含50%丙三醇的DMEM;
5. */EDTA;
6. Millicell微孔膜組織培養(yǎng)插片;
7. 塑料刮片和無菌棉拭子;

實(shí)驗(yàn)方法:
1. 用PBSA/GASP清洗組織;
2. 分離人羊膜,用戴手套的手從胎盤上將羊膜鈍性分離下來,分離出的羊膜薄層包括上皮細(xì)胞,基底膜和一些基質(zhì)組織;
3. 用無菌棉拭子除去基底膜下的基質(zhì)組織,使分離的羊膜盡可能的。
4. 在監(jiān)測(cè)供者血清以除外疾病的時(shí)期,可以將粗分離出的人羊膜保存在含有50%丙三醇的DMEM中,-70℃存放;
5. 臨用前解凍人羊膜,用PBSA清洗后將其切成直徑約為2mm的小塊;
6. 用*/EDTA消化組織塊,37℃,30min;
7. 用塑料刮片輕刮消化過的人羊膜,除去上皮細(xì)胞,注意不要破壞基底膜;
8. 用PBSA清洗裸露的羊膜,并將它的基底膜面(去除上皮細(xì)胞的面)黏附在Millicell微孔膜組織培養(yǎng)插片上;

 

上海莼試生物技術(shù)有限公司作者

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