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無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法

2011年08月23日 09:42:17人氣:856來(lái)源:上海酶聯(lián)生物研究所

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【資料簡(jiǎn)介】

目前,血清仍是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中zui基本的的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或者細(xì)胞生長(zhǎng)狀況不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛以后,再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個(gè)適應(yīng)過(guò)程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無(wú)血清培養(yǎng)。在降低過(guò)程中要注意觀察細(xì)胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細(xì)胞死亡,存活細(xì)胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。在實(shí)驗(yàn)后這些細(xì)胞一般不再繼續(xù)保留,很少有細(xì)胞能夠長(zhǎng)期培養(yǎng)于無(wú)血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)之前,要留有種子細(xì)胞,種子細(xì)胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,以保證細(xì)胞的特性不發(fā)生變化。
  
為了使細(xì)胞適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng),關(guān)鍵的是使所培養(yǎng)細(xì)胞:

1. 處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期

2. >90% 活細(xì)胞率

3. 適應(yīng)時(shí)以較高的起始細(xì)胞接種

上海酶聯(lián)生物研究所作者

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