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技術(shù)中心

原代細(xì)胞凍存技術(shù)

2012年01月12日 09:20:45人氣:185來(lái)源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

1、選用生長(zhǎng)情況好,數(shù)量較多的原代細(xì)胞,凍存前一天換液一次。
2、貼壁細(xì)胞需用0.25%*常規(guī)消化將細(xì)胞消化下來(lái),將細(xì)胞懸液收集至離心管中。
3、1000rpm離心5分鐘,棄上清液。
4、沉淀加含DMSO的培養(yǎng)液,計(jì)數(shù),調(diào)整至(1-10)×106/ml。
5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
6、密封凍存管,封口一定要嚴(yán),否則復(fù)蘇時(shí)易出現(xiàn)爆裂。
7、用記號(hào)筆標(biāo)明細(xì)胞種類(lèi),凍存日期。
8、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃過(guò)夜)→液氮。

上海研生實(shí)業(yè)有限公司作者

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