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熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG,Anti-TPⅠ/FITC
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關 鍵 詞 | 熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG,Anti-TPⅠ/FITC,熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG, |
- 【資料簡介】
熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG,Anti-TPⅠ/FITC
熒光素如FITC分子可以通過半透膜,而蛋白質(zhì)大分子不能透過,可將未與蛋白結(jié)合的熒光素透析除去。
(1)將標記完畢的熒光蛋白液裝入一透析袋或玻璃紙袋內(nèi),液面稍留空隙,緊扎。
(2)浸入0.02mol/pH
7.1~7.4的PBS中(懸于大于標記物體積約50~100倍的PBS內(nèi)),在4℃中透析,每日更換3~4次PBS,約5~7天,透析液中無熒即可(在熒光光源照射下)。除游離熒光素可用2×46cm柱層析法,詳細方法參閱第二章。加入熒光抗體15~18ml(按床體積的5%~10%加樣),使其緩慢滲入柱內(nèi),待即將全部入柱時,加入PBS少許,關閉下口,停留30~40min ,使游離熒光充分進入細篩孔中,然后再接通洗脫瓶開始滴入洗脫液。加入洗脫液一定量后,熒光抗體即向下移行,逐漸與存留于上端的游離熒光素之間拉開明顯的界線,隨著大量洗脫液的不斷加入,二者分離距離越來越大,熒光抗體zui先流出,分前、中、后三部分收集,測F/P比值,合格者合并,濃縮,分裝。洗脫液用20%磺基水楊酸測定蛋白(發(fā)生沉淀反應),繼續(xù)洗脫,游離熒光素則相繼被洗脫下來,至洗脫液中無蛋白和熒光素后,此層析柱即可再用。
若用以除去熒光抗體中的游離熒光素和硫酸銨等鹽類,可先在過柱前透析一夜,否則,NH4+太濃,在蛋白未*洗脫時即出現(xiàn)NH4+,因而影響提純與回收蛋白,一般待洗脫液出現(xiàn)蛋白時,即進行收集,之后出現(xiàn)SO4++(用1%BaCl2檢查發(fā)生白色沉淀)。zui后是NH4+,(用納氏試劑檢查呈黃棕色沉淀),待洗脫液無SO4++及NH4+后可再用。
如僅用小量熒光抗體,可用1×20cm的柱層析柱,取2g Sephadex G-50裝柱,即可過濾2~3.5ml熒光抗體。Anti-TPⅠ/FITC 熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG Anti-TRAF1/TNF-R1 /Biotin *化腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體 Anti-TRAF1/TNF-R1 /FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體IgG Anti-TRAF2/TNF-R2 /FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體IgG Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgG Anti-TRAF6 /FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體IgG Anti-TP-1/TEP1/FITC 熒光素標記端粒酶相關蛋白1抗體IgG Anti-TPⅡA/TOP2a/FITC 熒光素標記DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體IgG Anti-TRAIL/Apo2L /FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗體IgG Anti-Transthyretin /FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體IgG Anti-TRBF1 /FITC 熒光素標記端粒體復制結(jié)合因子1抗體IgG Anti-TRF/FITC 熒光素標記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體IgG Anti-TRF1/FITC 熒光素標記端粒結(jié)合蛋白1抗體IgG Anti-TRF2/FITC 熒光素標記端粒結(jié)合蛋白2抗體IgG Anti-TRH/FITC 熒光素標記促甲狀腺素釋放激素抗體IgG anti-rGST/HRP 辣根過氧化物酶標記重組*轉(zhuǎn)移酶GST標簽蛋白抗體IgG Anti-TRIM32/FITC 熒光素標記TRIM32抗體IgG Anti-TrK A/FITC 熒光素標記*激酶A抗體IgG Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標記*激酶A.B.C抗體IgG Anti-Trk B/FITC 熒光素標記*激酶B抗體IgG
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