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奶牛鋅(zinc)Elisa試劑盒技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

2013年05月31日 15:13:20人氣:661來源:上海研盟生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞zinc,奶牛鋅,試劑盒,說明書
【資料簡介】

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奶牛鋅(zinc)操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
8µg/L  5號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4µg/L  4號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2µg/L  3號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1µg/L  2號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.5µg/L  1號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl 然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。     
4.  配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。  
7.  溫育:操作同3。
8.  洗滌:操作同5。
9.  顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.  終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.  測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。  測定應(yīng)在加終止
液后15分鐘以內(nèi)進行。

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奶牛鋅(zinc)計算
    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

上海研盟生物科技有限公司 作者

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