大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒技術(shù)支持

【資料簡(jiǎn)介】

大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）水平。用純化的大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α顆粒膜蛋白（GMP-140），再與HRP標(biāo)記的α顆粒膜蛋白（GMP-140）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α顆粒膜蛋白（GMP-140）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）濃度。

大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

20μg/L	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10μg/L	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5μg/L	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5μg/L	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.25μg/L	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

Anti-CTn1（Cardiac troponin 1）  心肌肌鈣蛋白抗體
Anti-CT-1/CTF1（Cardiotrophln 1）  心肌營(yíng)養(yǎng)素1抗體
Anti-CA I（Carbonic anhydrase I）  碳酸酐酶1抗體
Anti-CTNNAL1（catenin（cadherin-associated protein）alpha-like1）  粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體
Anti-CA Ⅱ（Carbonic anhydrase Ⅱ）  碳酸酐酶2抗體
Anti-CAS （Cellular Apoptosis Susceptibility）  細(xì)胞凋亡敏感性基因
Anti-Caspase-1 （ICE/CASP-1/P45）  天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體
Anti-Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10抗體
Anti-Caspase-12（rat mouse）  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體（大、小鼠）
Anti-Caspase-12（hunman）  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體（人）
Anti-Caspase-13  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體
Anti- Caspase-3（Active）/caspase-3 p17 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-procaspase 3   半胱天冬酶-3酶原抗體
Anti-CASP4（Caspase-4）  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體
Anti-Caspase-6 （CT）  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（C端）
Anti-Caspase-6 （NT）  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（N端）
Anti-Caspase-6 （NT）mouse  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（N端）