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技術(shù)中心

血液核酸篩查系統(tǒng)介紹

2010年06月07日 17:26:40人氣:1092來源:上海酶聯(lián)生物研究所

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血液核酸篩查系統(tǒng)介紹

獻(xiàn)血是我國醫(yī)用血液的zui主要來源,根據(jù)全國血液中心1999年的統(tǒng)計,我國各主要血站采集的血液樣本達(dá)到680萬份,為2百萬病人提供血液進(jìn)行輸血治療。一直以來, 我國血站的血液病毒篩查都是使用免疫學(xué)方法, 大部分血站是用國產(chǎn)ELISA試劑做兩遍測試,檢查項目包括:乙肝表面抗原(HBSAg),丙肝抗體(HCVAb)和愛滋病毒抗體(HIVAb)。該方法操作程序復(fù)雜,靈敏度較低(檢出下限約為106拷貝),重復(fù)性較差,同時存在抗原抗體的變異,再加上病毒感染的窗口期,使得酶聯(lián)免疫方法存在一定程度的漏檢,每年7百萬份血液篩查的漏檢構(gòu)成輸血安全的極大威脅,近年來,因輸血導(dǎo)致輸血后肝炎的訴訟也不斷增加,血液安全再次受到全會的關(guān)注。

  為保障輸血安全,世界各國不斷改進(jìn)血液篩查技術(shù),核酸檢測技術(shù)(NAT)由于靈敏度高,準(zhǔn)確性強(qiáng),重復(fù)性好,而且是直接檢測病毒本身,受到各國血液篩查工作者的重視。隨著核酸檢測技術(shù)的發(fā)展和成熟,尤其是熒光基因探針PCR方法的應(yīng)用 ,NAT逐漸進(jìn)入血液篩查領(lǐng)域,近年美國紅十字會開始將NAT應(yīng)用于血液篩查,明顯提高了HBV、HCV和HIV的檢測率。歐洲和日本也普遍采用NAT作為血液的復(fù)篩手段。

  熒光基因探針PCR方法是一種用體外擴(kuò)增技術(shù)(PCR)來檢測病毒核酸的方法,由于采用了的熒光信號探針技術(shù)(通過標(biāo)記有熒光基團(tuán)的探針來顯示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物增加的動態(tài)過程)和實時基因探針檢測技術(shù)(用自動化儀器連續(xù)檢測和分析PCR反應(yīng)過程中的動力學(xué)過程,實現(xiàn)準(zhǔn)確基因探針計算),具有很高的靈敏度(可檢出1個拷貝的目的基因)和準(zhǔn)確性,是當(dāng)前世界上的分子基因探針檢測技術(shù)。

  我國是肝炎病毒的高流行區(qū),1995年全國肝炎流行病學(xué)調(diào)查研究結(jié)果顯示,約9.75%的人群為HBsAg攜帶者,3.2%的人群抗-HCV陽性,HIV的感染率迅速上升。zui近的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,人群中乙肝攜帶者已上升到10~12%,丙肝攜帶者也有近5%。而我國的ELISA產(chǎn)品質(zhì)量一直存在不穩(wěn)定的問題(根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心的2000年室間質(zhì)控報告),加上ELISA固有的方法學(xué)上的缺陷,在這樣一個高流行人群中,征集篩查健康安全的醫(yī)療用血是血液事業(yè)的重要工作,核酸檢測技術(shù)及其標(biāo)準(zhǔn)急待于在我國被確立和推廣應(yīng)用。 
 
   然而,我國的血液篩查還存在一個經(jīng)濟(jì)成本問題。目前每份血樣的病毒篩查費用是10-15元/遍,而如果要采用NAT,費用將上升到200-300元,這將極大的限制NAT的實際應(yīng)用。解決這一問題的方法,就是大幅度提高NAT試劑的靈敏度,以實現(xiàn)對10至12份血樣的混合檢測(pooling),這樣,平均每份血樣的病毒篩查費用將下降到是30元以下,為實際推廣應(yīng)用鋪平道路。

上海酶聯(lián)生物研究所作者

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