血液核酸篩查系統(tǒng)介紹

【資料簡介】

血液核酸篩查系統(tǒng)介紹

獻(xiàn)血是我國醫(yī)用血液的zui主要來源，根據(jù)全國血液中心1999年的統(tǒng)計，我國各主要血站采集的血液樣本達(dá)到680萬份，為2百萬病人提供血液進(jìn)行輸血治療。一直以來， 我國血站的血液病毒篩查都是使用免疫學(xué)方法， 大部分血站是用國產(chǎn)ELISA試劑做兩遍測試，檢查項目包括：乙肝表面抗原（HBSAg）,丙肝抗體（HCVAb）和愛滋病毒抗體（HIVAb）。該方法操作程序復(fù)雜，靈敏度較低（檢出下限約為106拷貝），重復(fù)性較差，同時存在抗原抗體的變異，再加上病毒感染的窗口期，使得酶聯(lián)免疫方法存在一定程度的漏檢，每年7百萬份血液篩查的漏檢構(gòu)成輸血安全的極大威脅，近年來，因輸血導(dǎo)致輸血后肝炎的訴訟也不斷增加，血液安全再次受到全會的關(guān)注。

　　為保障輸血安全，世界各國不斷改進(jìn)血液篩查技術(shù)，核酸檢測技術(shù)（NAT）由于靈敏度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，重復(fù)性好，而且是直接檢測病毒本身，受到各國血液篩查工作者的重視。隨著核酸檢測技術(shù)的發(fā)展和成熟，尤其是熒光基因探針PCR方法的應(yīng)用 ，NAT逐漸進(jìn)入血液篩查領(lǐng)域，近年美國紅十字會開始將NAT應(yīng)用于血液篩查，明顯提高了HBV、HCV和HIV的檢測率。歐洲和日本也普遍采用NAT作為血液的復(fù)篩手段。

　　熒光基因探針PCR方法是一種用體外擴(kuò)增技術(shù)（PCR）來檢測病毒核酸的方法，由于采用了的熒光信號探針技術(shù)（通過標(biāo)記有熒光基團(tuán)的探針來顯示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物增加的動態(tài)過程）和實時基因探針檢測技術(shù)（用自動化儀器連續(xù)檢測和分析PCR反應(yīng)過程中的動力學(xué)過程，實現(xiàn)準(zhǔn)確基因探針計算），具有很高的靈敏度（可檢出1個拷貝的目的基因）和準(zhǔn)確性，是當(dāng)前世界上的分子基因探針檢測技術(shù)。

　　我國是肝炎病毒的高流行區(qū)，1995年全國肝炎流行病學(xué)調(diào)查研究結(jié)果顯示，約9.75％的人群為HBsAg攜帶者，3.2％的人群抗-HCV陽性，HIV的感染率迅速上升。zui近的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，人群中乙肝攜帶者已上升到10~12％，丙肝攜帶者也有近5％。而我國的ELISA產(chǎn)品質(zhì)量一直存在不穩(wěn)定的問題（根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心的2000年室間質(zhì)控報告），加上ELISA固有的方法學(xué)上的缺陷，在這樣一個高流行人群中，征集篩查健康安全的醫(yī)療用血是血液事業(yè)的重要工作，核酸檢測技術(shù)及其標(biāo)準(zhǔn)急待于在我國被確立和推廣應(yīng)用。　
　
　　 然而，我國的血液篩查還存在一個經(jīng)濟(jì)成本問題。目前每份血樣的病毒篩查費用是10-15元/遍，而如果要采用NAT，費用將上升到200-300元，這將極大的限制NAT的實際應(yīng)用。解決這一問題的方法，就是大幅度提高NAT試劑的靈敏度，以實現(xiàn)對10至12份血樣的混合檢測（pooling），這樣，平均每份血樣的病毒篩查費用將下降到是30元以下，為實際推廣應(yīng)用鋪平道路。