亚洲精品中文视频,在线观看aaa,丁香五月欧美成人,亚洲成人高清,成人免费观看视频在线观看,在线日韩中文,成人av免费播放

技術(shù)中心

9015-85-4,T4 DNA連接酶生產(chǎn)

2014年06月11日 13:57:07人氣:213來源:上海廣銳生物科技有限公司

資料類型doc文件資料大小40448
下載次數(shù)70資料圖片 【點(diǎn)擊查看】
上 傳 人上海廣銳生物科技有限公司 需要積分0
關(guān) 鍵 詞9015-85-4,T4 DNA連接酶生產(chǎn),廣銳生物,9015-85-4,T4 DNA連接酶生產(chǎn),E
【資料簡(jiǎn)介】

英文名稱:T4 DNA Ligase 
CAS號(hào):9015-85-4

級(jí)別:BR
分子量:55.3kDa,單體
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:1u/ul(200CEU/ul)

9015-85-4,T4 DNA連接酶生產(chǎn)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量) 
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液:50%(w/v)聚乙二醇4000
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:聚乙二醇(PEG)可*地增加平末端DNA的連接效率,PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%(w/v),T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存,轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%,電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測(cè)試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè):粘性末端或平末端DNA的連接能力

9015-85-4,T4 DNA連接酶生產(chǎn)
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對(duì)單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接,雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接,雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù),連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè),位點(diǎn)特異性突變,擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存: -20°C

上海廣銳生物科技有限公司作者

上一篇:GG93-PTX760 防爆無線對(duì)講機(jī)

下一篇:DY19-6254168 綜合測(cè)試儀


我要投稿
  • 投稿請(qǐng)發(fā)送郵件至:(郵件標(biāo)題請(qǐng)備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯(lián)系電話0571-87759680
環(huán)保行業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)+”服務(wù)平臺(tái)
環(huán)保在線APP

功能豐富 實(shí)時(shí)交流

環(huán)保在線小程序

訂閱獲取更多服務(wù)

微信公眾號(hào)

關(guān)注我們

抖音

環(huán)保在線網(wǎng)

抖音號(hào):hbzhan

打開抖音 搜索頁(yè)掃一掃

視頻號(hào)

環(huán)保在線

公眾號(hào):環(huán)保在線

打開微信掃碼關(guān)注視頻號(hào)

快手

環(huán)保在線

快手ID:2537047074

打開快手 掃一掃關(guān)注
意見反饋