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大豆凝集素(SBA)酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明

2014年07月24日 14:02:30人氣:420來(lái)源:上海谷研試劑有限公司

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關(guān) 鍵 詞大豆凝集素(SBA)酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明
【資料簡(jiǎn)介】

大豆凝集素(SBA)酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明

試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍: 96T

50ng/L -850 ng/L

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中大豆凝集素(SBA)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大豆凝集素(SBA)水平。用純化的大豆凝集素

(SBA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大豆凝集素(SBA),再與HRP 標(biāo)記的大豆凝集素(SBA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大豆凝集素(SBA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大豆凝集素(SBA)濃度。

試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×瓶 終止液 6ml×

酶標(biāo)試劑 6ml×瓶 標(biāo)準(zhǔn)品(1600ng/L) 0.5ml×

酶標(biāo)包被板 12 孔×條 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×

樣品稀釋液 6ml×瓶 10 說(shuō)明書(shū) 

顯色劑液 6ml×瓶 11 封板膜 

顯色劑液 6ml×1/瓶 12 密封袋 個(gè)

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

800ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

400ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

200ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

100ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

50ng/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育3分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù),拍干。

上海谷研試劑有限公司作者

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