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技術(shù)中心

人肺腺癌細(xì)胞

2014年09月29日 11:47:31人氣:797來源:上海滬震生物科技有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

中文名稱:人肺腺癌細(xì)胞

英文名稱:CaLu-3

組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),人肺腺癌細(xì)胞深入生物醫(yī)學(xué)的每一個(gè)角落,其背景知識(shí),實(shí)是淵深海闊,涉及的相關(guān)領(lǐng)域很多,如:組織學(xué)、胚胎學(xué)、解剖學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)等等;而作為研究手段和方法,組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,如:細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、發(fā)育學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)等等。因此,組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是從事生物醫(yī)學(xué)的研究人員應(yīng)熟悉和掌握的基本技術(shù)。

. 人肺腺癌細(xì)胞細(xì)胞計(jì)數(shù)

實(shí)驗(yàn)原理:當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí),通過測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細(xì)胞懸z液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。

準(zhǔn)備工作: 取一瓶傳代的細(xì)胞,按照《傳代細(xì)胞培養(yǎng)(消化法)》中的傳代方法繁殖細(xì)胞,待長(zhǎng)成單層后以被使用。

細(xì)胞懸液制備: 細(xì)胞懸液的制備方法是用0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗滌后,加入培養(yǎng)液(或Hanks液或PBS等平衡鹽溶液),吹打制成待測(cè)細(xì)胞懸液。

細(xì)胞計(jì)數(shù):

1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。

2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。

3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。

4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。

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