細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光說明書

【資料簡介】

主要用途

 細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過AMMC去甲基化酶反應(yīng)系統(tǒng)中AMMC轉(zhuǎn)化為AMHC后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。AMMC羥基化酶（AMMC 7-hydroxylase）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶2D6的診斷標(biāo)記，其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細(xì)胞色素P450亞酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表達(dá)在肝、腎、胎盤、腦、乳腺、肺、和腸道組織中，是肝組織細(xì)胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態(tài)性酶，在80多個等位基因上，出現(xiàn)變異，具有個體和種族差異，與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發(fā)生，以及藥物代謝敏感性差異存在相關(guān)性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物，尤其含有堿性氮原子（basic nitrogen atom）的藥物，包括異喹胍（debrisoquine）的4-羥基化、鷹爪豆堿（sparteine）的氧化、抗抑郁癥藥物、神經(jīng)松弛藥（neuroleptic），以及內(nèi)源性5-羥色胺（hydroxytryptamine）、神經(jīng)類固醇（neurosteroid）等。同時會產(chǎn)生肝毒性的乙酰苯醌亞胺（N-acetyl-p-benzyquinone imine）。 基于選擇性底物AMMC（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-methoxy-4-methylcoumarin）在CYP2D6的去甲基化（o-demethylation）作用下，轉(zhuǎn)化為AMHC羥基香豆素（3（2（N,N-diethyl-N-methyl ammonium）-ethyl）7-hydroxy-4-methylcoumarin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長405nm，散發(fā)波長460nm），來定量測定細(xì)胞色素P450酶2D6的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：