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辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒簡介

2015年10月06日 09:20:23人氣:354來源:上海酶聯(lián)生物研究所

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關 鍵 詞辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒
【資料簡介】

產(chǎn)品簡介: 辣根過氧化物酶標記抗體是目前廣泛用于免疫學與分子生物學、免疫細胞化學、病理學診斷以及自身免疫性疾病的臨床免疫學診斷。該產(chǎn)品為辣根過氧化物酶標記的親和純化OVA。
穩(wěn)定性: 液體-20℃以下可保存可一年穩(wěn)定,凍干粉-20℃以下可保存兩年以上穩(wěn)定,避免反復凍融。使用時應按所需的濃度進行稀釋,應該現(xiàn)用現(xiàn)配,因為稀釋后的溶液中抗體及酶的有效活性會很快降低。

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒應用范圍:
1. 抗原決定族的抗原性分析鑒定,各種抗原、抗體的定量、定性及定位分
析測定等。
2. ELISA 法: 1:2000~10000
3. 免疫印跡法:1:2000~5000
4. 免疫組化: 1:200~500

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒將抗原或抗體固定在固相載體上的過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少,僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴氨酸、*等作預包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

辣根過氧化物酶標記(OVA)ELISA試劑盒結(jié)果計算與判斷
1. 所有OD值都應減除空白值后再行計算。
2. 以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。
3. 根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-18BP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。

上海酶聯(lián)生物研究所作者

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