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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

大鼠胚成纖維分離自胚胎；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞，能產(chǎn)生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子，而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的大鼠胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human mitogen activated protein kinase /MAP kinase (MAPK) ELISA Kit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒

Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAprotinin,APELISA試劑盒人(AP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PAI-1

纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PAI2

血小板活化因子受體   英文名稱：   Human Platelet Activating Factor Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PAFR

血小板衍生生長因子c   英文名稱：   Human Platelet Derived Growth Factor C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF-C

大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ 1-42)ELISA試劑盒 ，英文名： Aβ 1-42 ELISA Kit

Mouse follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforIL-1(HumanIerleukin1)ELISAKit人白介素1規(guī)格：48T/96T

通用型離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitACE大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶規(guī)格：48T/96T

ENPP2重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標簽) Protein

Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)

ANTXR1重組人 ANTXR1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)

ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標簽)

大鼠胚成纖維細胞促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)

ART4重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 標簽)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。