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上海博湖生物科技有限公司
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Taq DNA聚合酶具有的特點(diǎn)
2023-5-29 閱讀(960)
Taq DNA多聚酶是耐熱DNA聚合酶，是從水棲高溫菌（Thermus aquaticus）中分離的，由分子量為109000的一條多肽鏈構(gòu)成。dna聚合酶具有幾種功能：一是聚合作用，以DNA為模板，將dNTP中的脫氧單核苷酸逐個(gè)加到3’末端。二是有3’→5’外切酶活力，能識(shí)別和消除錯(cuò)配的引物末端，與復(fù)制過(guò)程中校正功能有關(guān)。三是5’→3’外切酶活力，它能從5’端水解核苷酸，還能經(jīng)過(guò)幾個(gè)核苷酸起作用，切除錯(cuò)配的核苷酸。在體外實(shí)驗(yàn)中，Taq DNA聚合酶的出錯(cuò)率為10-4～10-5。
Taq DNA聚合酶具有以下特點(diǎn)：
1、耐高溫，在70℃下反應(yīng)2小時(shí)后其殘留活性在90%以上，在93℃下反應(yīng)2小時(shí)后其殘留活性是仍能保持60%，而在95℃下反應(yīng)2小時(shí)后為原來(lái)的40%。
2、在熱變性時(shí)不會(huì)被鈍化，故不必在擴(kuò)增反應(yīng)的每輪循環(huán)完成后再加新酶。
3、一般擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度可達(dá)2.0 kb，且特異性也較高。
一典型的PCR反應(yīng)約需的酶量為2.5u（總反應(yīng)體積為50ml時(shí)），濃度過(guò)高可引起非特異性擴(kuò)增，濃度過(guò)低則合成產(chǎn)物量減少。
