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上海博湖生物科技有限公司

主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒

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ELISA結(jié)合物的定量測定

2025-3-17  閱讀(157)

  ELISA結(jié)合物的定量測定:
 
  一般是對結(jié)合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定,然后按下列公式計算:
 
  酶量(mg/ml)=OD403×0.42
 
  IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62
 
  對于過碘酸鈉氧化法制備的標(biāo)記抗體量,按下列公式計算:
 
  IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62
 
  已知酶量和IgG量后,即可計算出標(biāo)記抗體的摩爾(mol)比值。
 
  HRP/IgG摩爾比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4
 
  結(jié)合物中酶總量=HRP(mg/ml)×結(jié)合物溶液量
 
  結(jié)合物產(chǎn)率=結(jié)合物中酶總量/標(biāo)記時加入的酶量×100%
 
  用于ELISA的結(jié)合物的酶量為400(g/ml時效果一般,為500(g/ml時效果較好,達 1000(g/ml時效果好。mol.比值由于結(jié)合物中含的IgG并不wan全可靠,所以不能作為主要參數(shù)。一般認為mol.比值為0.7時效果一般,1.0時效果較好,1.5-2.0時最好。酶結(jié)合率為 7%時效果一般,為9%-10%較好,達30%以上時最好。
 


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