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上海博湖生物科技有限公司
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大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒操作說(shuō)明
2019-12-11 閱讀(129)
| 提 供 商 | 上海博湖生物科技有限公司 | 資料大小 | 22.4KB |
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大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒操作說(shuō)明
雪還在下著，不一會(huì)兒就變成了鵝毛大雪，隨風(fēng)飄舞，天地間變成了白茫茫的一片，這些可愛(ài)的雪 精靈還在半空中跳著舞呢。這個(gè)雪和南北極的雪不同的，那里的雪下起來(lái)，像利劍一樣，鋪天蓋地的， 四周變得昏暗，不明亮，不見(jiàn)一絲光。而這里的雪呢?輕飄飄的，就如從天空中撒下千萬(wàn)顆珍珠。接下來(lái)介紹 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒操作說(shuō)明。
以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
特性：
（1）組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
