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向培養(yǎng)基細胞里面加入生長因子的方法討論

時間:2014/8/19閱讀:4923
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向培養(yǎng)基細胞里面加入生長因子的方法討論

  生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴格的營養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)基細胞提供自己的營養(yǎng)因子,二是在培養(yǎng)基中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長,所需的生長因子便會積累到可觀的數(shù)值,尤其當培養(yǎng)基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時間里不作任何變動,以使營養(yǎng)(生長)因子積累,而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是,這種對營養(yǎng)(生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖,某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進行相當高密度的細胞培養(yǎng)。因為培養(yǎng)基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過了高密度培養(yǎng))進行,或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。

  滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過,只有少數(shù)對這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細胞類型的細胞才能生長。

含225ml LB肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于李斯特氏菌制樣和前增菌培養(yǎng)(GB 標準)
LB Broth
萘啶酮酸 5.0mg/支*5 每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉湯
Nalidixic Acid
吖啶黃素 3.0mg/支*5 培養(yǎng)基每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉湯
Acridine Flavin
含225ml FB增菌液均質(zhì)袋 0個/包 用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN 標準)
FB Broth
FB(Half-Fraser)添加劑(A、B) 2ml/支*40 每支添加到225ml HBJ006中
FB additive(A、B)
含225ml GN增菌液均質(zhì)袋 0個/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
GN Enrichment Broth
含00ml GN增菌液均質(zhì)袋 0個/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
GN Enrichment Broth
含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
Shigella Enrichment Broth
新生霉素 ml/支*5 每支添加于225ml HBJ8663中
Novobiocin
培養(yǎng)基含225ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于金葡菌前增菌培養(yǎng)
7.5% NaCl Broth
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于金葡菌增菌培養(yǎng)
7.5% NaCl Broth
含225ml 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于金葡菌前增菌培養(yǎng)
0% NaCl Trypticase Soy Broth
含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋 0個/包 用于空腸彎曲菌的前增菌
Brucella Broth

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