南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司作者
液相色譜法(HPLC)是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物(包括能通過化學反應轉變?yōu)橛袡C化合物的無機物)的有效方法之一。
該設備利用液體作流動相對高沸點化合物、熱不穩(wěn)定化合物、大分子化合物、高聚物、生物制品等有很好的分離效果。適用于低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差的有機化合物、大分子化合物、生物制品的分離,同時可為紅外、核磁、質譜等結構分析儀器提供純化樣品,在有機合成、化工分析、天然產物分析、生化、醫(yī)藥、環(huán)境科學、食品科學等諸多方面得到了廣泛的應用。
在已知的有機化合物中,約有80%能用液相色譜法分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點、難氣化揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的有機化合物和生命物質。
液相色譜法操作流程
1、開機:依次打開脫氣機、色譜泵、檢測器、計算機電源;待各設備自檢正常后,啟動色譜管理系統(tǒng)。
2、流動相準備:過濾,脫氣。
3、色譜泵排氣
4、安裝色譜柱
5、平衡流動相(有機溶劑與緩沖鹽溶液切換時等易產生沉淀,需先使用90%超純水/10%甲醇作為流動相沖洗系統(tǒng))
6、數據采集、進樣
7、沖洗管路及色譜柱
8、數據處理
9、關機
10、記錄相關信息
對檢測器的要求:靈敏度高、重現性好、線性范圍寬、死體積小、對溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測器、熒光檢測器、示差檢測器等。
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